在本次臨床試驗中，研究團隊通過篩選HLA-A、HLA-B和HLA-DR純合的健康志愿者，建立了臨床可用的iPSC庫，并選用了在日本人群中最常見的HLA單倍型細胞系。該細胞系在六個位點（HLA-A、B、C、DR、DQ和DP）均為純合型，理論上可與約16.9%的日本人群匹配（圖1）。

實際篩選的213名患者中，23人完成了HLA分型，其中4人完全匹配，最終入組的7名患者中有3人達到了完全HLA匹配。這表明，雖然招募標準并未以HLA匹配為核心，但仍有部分患者天然具備免疫學(xué)上的良好相容性。

進一步的實驗分析顯示，iPSC衍生神經(jīng)細胞在分化過程中呈現(xiàn)較低的HLA I類和極低的HLA II類分子表達水平，尤其是相比外周血單核細胞或iPSC衍生樹突狀細胞時。這種低免疫原性有助于減少移植物被宿主免疫系統(tǒng)清除的風險。

同時，當神經(jīng)細胞暴露于促炎環(huán)境（如IFN-γ）時，HLA I類分子會有所上調(diào)，但整體免疫原性依然低于高免疫活性的樹突狀細胞。這些結(jié)果提示：即便在存在一定的HLA不匹配情況下，iPSC神經(jīng)細胞也可能憑借其低免疫原性，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)這一免疫豁免環(huán)境中實現(xiàn)穩(wěn)定移植。

在確定了細胞本身的低免疫原性后，下一個關(guān)鍵問題是：所選擇的免疫抑制方案是否足夠有效且安全？

研究結(jié)果表明，在接受移植的PD患者中，通過口服他克莫司維持5–10ng/mL的谷濃度，免疫抑制過程得到了穩(wěn)定控制（圖1C）。所有受試者在隨訪期間均未出現(xiàn)嚴重腎功能損傷或機會性感染等免疫抑制相關(guān)不良事件，這說明在精確監(jiān)測和嚴格入組標準下，他克莫司不僅具備良好的可行性，而且耐受性較高，能夠在移植后長期使用而不引發(fā)明顯并發(fā)癥。

與此同時，通過TSPO-PET和MRI對小膠質(zhì)細胞活化及炎癥反應(yīng)的監(jiān)測，進一步證實了免疫控制的有效性（圖2）。無論是在移植后免疫抑制維持階段，還是在停藥16個月后，均未觀察到顯著炎癥跡象。這一結(jié)果提示，他克莫司在中樞神經(jīng)系統(tǒng)移植中既能提供足夠的免疫抑制以保護移植物，又不會導(dǎo)致過度抑制引發(fā)炎癥或感染，為CNS干細胞移植建立了較為安全可行的免疫管理方案。

除了影像學(xué)和臨床監(jiān)測，血清中的炎癥標志物能否作為反映移植后免疫反應(yīng)的靈敏指標？

檢測結(jié)果顯示，大多數(shù)受試者在移植后并未出現(xiàn)持續(xù)性或顯著的炎癥標志物升高。PD02僅在術(shù)后第1天出現(xiàn)短暫升高，隨后恢復(fù)正常；而 HLA匹配的PD04在術(shù)后20個月出現(xiàn)部分炎癥因子升高，但停用他克莫司后并未再有類似變化。這提示移植相關(guān)的炎癥反應(yīng)總體可控，偶發(fā)的標志物波動更可能與生理波動或檢測誤差相關(guān)，而非持續(xù)的排斥反應(yīng)。

ELISA的結(jié)果進一步說明了這一點：雖然PD01和PD04的術(shù)前IFN-γ略高（圖3A），尤其是在PD01中，IFN-γ 水平在整個觀察期內(nèi)保持略微升高，可能與個體存在慢性炎癥背景有關(guān)，而非單純移植導(dǎo)致。同時，PD01、PD02和PD04術(shù)前IL-2在部分受試者中略高，但移植后降低，可能由于使用他克莫司（圖3B）。TNF-α在所有檢測中均低于檢出限，表明未出現(xiàn)明顯的系統(tǒng)性炎癥。這些結(jié)果綜合提示，血清標志物的輕度波動并未影響整體免疫耐受，移植后的免疫環(huán)境仍處于穩(wěn)定狀態(tài)。

一個核心的疑慮是：HLA不匹配是否終究會影響移植物的長期命運？

本臨床試驗證明，為期15個月的他克莫司單藥治療成功控制了所有7名患者的免疫反應(yīng)，無論其HLA匹配狀態(tài)如何。通過PET成像和血清檢測證實，供體細胞在所有患者體內(nèi)均成功存活，且未引發(fā)具有臨床意義的排斥反應(yīng)。這一重要發(fā)現(xiàn)表明，對于帕金森病的干細胞治療，采用這種相對溫和的免疫抑制方案是可行且有效的，這顯著區(qū)別于需要強效聯(lián)合用藥的傳統(tǒng)器官移植方案，這為干細胞治療帕金森病提供了更具安全性和可行性的臨床依據(jù)。

不過，從免疫學(xué)角度看，HLA不匹配并非毫無影響。在體外實驗中，HLA不匹配的供受者樣本表現(xiàn)出更明顯的T細胞激活反應(yīng)，但這一反應(yīng)主要在iPSC衍生的樹突狀細胞中發(fā)生，而在iPSC-DANs中反應(yīng)明顯減弱。這表明iPSC-DANs由于其較低的HLA表達水平，天然具有較低免疫原性，從而減輕了不匹配帶來的排斥風險。因此，雖然存在理論上的免疫激活可能，但在臨床免疫抑制的保護下，移植物仍能在宿主體內(nèi)長期穩(wěn)定存活。

這些發(fā)現(xiàn)引出了一個更深遠的問題：為什么在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的干細胞移植中，我們可以有信心地考慮降低免疫抑制強度？

以往針對帕金森病的開放標簽臨床試驗及近期ESC來源的細胞治療研究普遍采用多藥聯(lián)合免疫抑制方案，如環(huán)孢素、糖皮質(zhì)激素和硫唑嘌呤，通常維持約1年以獲得足夠的免疫抑制效果。然而，與器官移植不同，PD移植物排斥并不危及生命，而強烈免疫抑制可能增加機會性感染、肝功能損害及骨髓抑制等副作用風險。因此，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)移植中，適度降低免疫抑制強度可在控制排斥反應(yīng)的同時減少不良事件發(fā)生。

動物實驗進一步支持了這一觀點：猴模型中iPSC衍生多巴胺能神經(jīng)前體細胞（iPSC-DAN）的異體移植顯示，大腦神經(jīng)細胞移植不易引發(fā)急性排斥，即使在HLA不匹配且未使用免疫抑制的對照動物中，免疫反應(yīng)也要到移植后第二個月才出現(xiàn)。

此外，僅使用他克莫司即可維持異種移植物在猴體內(nèi)存活超過兩年。他克莫司快速穿過血腦屏障并在腦內(nèi)長期保持，有別于環(huán)孢素A。同時，相較于胎兒VM供體，PSC衍生供體更未成熟、純度更高、免疫原性更低，這也為降低免疫抑制強度提供了合理依據(jù)。本試驗中，部分受者實現(xiàn)HLA同型合子匹配，即使在不完全匹配組，其HLA-A位點仍實現(xiàn)匹配，從而進一步降低了排斥風險。

如何有效監(jiān)測中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細胞移植的免疫反應(yīng)？

為了提高干細胞療法的安全性與有效性，本研究對個體病例進行了免疫學(xué)監(jiān)測，主要通過多時間點的TSPO-PET掃描進行。然而，盡管 [18F]GE180 PET已在多發(fā)性硬化和阿爾茨海默病神經(jīng)炎癥檢測中顯示出效果，其在CNS細胞治療中的敏感性和特異性尚未完全明確。

在食蟹猴實驗中，第一代TSPO-PET示蹤劑[11C]PK11195能捕捉到MHC 不匹配異體移植物的免疫反應(yīng)，但無法檢測自體或MHC匹配移植物的反應(yīng)。在本試驗中，[18F]GE180 PET并未顯示積聚現(xiàn)象，提示在免疫抑制方案下移植物未引起可檢測的炎癥反應(yīng)，所有患者順利完成免疫抑制治療。

由于PET成本高昂，研究同時探索了更經(jīng)濟的免疫檢測方法，包括血液標志物、供體特異性抗體（DSA）及混合淋巴細胞反應(yīng)（MLR）。結(jié)果顯示，術(shù)后及停用他克莫司后，炎癥標志物和DSA均未顯著升高，iPSC-DANs的MLR也未顯示免疫反應(yīng)，與臨床觀察一致。

但在HLA不匹配病例中，使用高靈敏度iPSC-DCs的MLR顯示顯著T細胞激活，尤其在移植后3個月時，提示存在潛在的免疫風險。然而，該高靈敏度MLR結(jié)果與神經(jīng)功能評分及[18F]DOPA PET的臨床效果未呈現(xiàn)相關(guān)性，說明即便存在體外免疫反應(yīng)，臨床移植物仍能穩(wěn)定存活。

HLA匹配和低免疫原性iPSC對CNS移植有多大影響？

與胚胎干細胞（ESCs）相比，誘導(dǎo)多能干細胞（iPSCs）在自體移植或HLA匹配移植中具有潛在優(yōu)勢，尤其在降低排斥風險方面更具靈活性。盡管本研究未觀察HLA匹配在臨床上帶來顯著優(yōu)勢，但HLA匹配或不匹配狀態(tài)仍可能影響免疫反應(yīng)，尤其涉及自然殺傷（NK）細胞和次要抗原的活化。因此，即便使用HLA同型合子或HLA敲除iPSCs，先天免疫監(jiān)視仍需納入移植設(shè)計和管理考量。

當前研發(fā)趨勢已從建立HLA同型合子iPSC庫，轉(zhuǎn)向通過基因編輯構(gòu)建低免疫原性或通用型多能干細胞（PSCs），以適用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)及更高免疫排斥風險的組織類型。這些策略可能特別適合免疫抑制風險較高的PD患者。

例如，本試驗在招募階段就排除了若干腎功能不全候選人?？偟膩碚f，本研究顯示傳統(tǒng)免疫抑制方案可在干細胞治療中減弱排斥反應(yīng)，但為實現(xiàn)個體化、必要且充分的免疫抑制，仍需進一步探索移植物在CNS中的免疫機制，并開發(fā)相應(yīng)的免疫監(jiān)測方法。

結(jié)語：這項開創(chuàng)性的臨床試驗，究竟為帕金森病的治療帶來了哪些新的希望？

這項首次使用同種異體iPSCs的人體臨床試驗為帕金森病提供了新的治療可能性。研究表明，即便僅使用單一免疫抑制藥物他克莫司，移植的多巴胺能神經(jīng)前體細胞（iPSC-DANs）在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)也能安全存活，且未出現(xiàn)顯著的臨床免疫反應(yīng)。這意味著未來針對PD的干細胞治療可以在降低免疫抑制強度的情況下實現(xiàn)細胞存活和功能整合，從而減少藥物相關(guān)副作用的風險，提高治療的安全性和可行性。

此外，研究發(fā)現(xiàn)iPSC-DANs中低水平的HLA表達可能是成功植入的關(guān)鍵，即使受者與供體HLA不完全匹配，也能在CNS免疫豁免環(huán)境中存活。這為廣泛應(yīng)用同種異體iPSC移植提供了理論依據(jù)，降低了對完全HLA匹配的依賴，使更多患者有機會接受干細胞療法，為帕金森病的再生醫(yī)學(xué)治療開辟了新的前景。

參考資料：

[1]:https://www.cell.com/cell-stem-cell/fulltext/S1934-5909(25)00269-3

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